大鼠L-鼠乳酸脫氫酶(L-LDH) elisa試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

A549, 人肺癌細(xì)胞系
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A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細(xì)胞
WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細(xì)胞株
U-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞
WM451, 人黑色素瘤細(xì)胞
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細(xì)胞
C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
UM-UC-3, 人膀胱移行細(xì)胞癌
Hela, 人宮頸癌細(xì)胞系
HNE2, 人鼻咽癌細(xì)胞系
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細(xì)胞系
786-O [786-0], 人腎透明腺癌細(xì)胞
HEC-1A, 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
Caki-1, 人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞
Ishikawa, 人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系
ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞
JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
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RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系
Ca Ski, 人宮頸癌細(xì)胞
MCF-7 [MCF7], 人乳腺癌細(xì)胞系
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
GBC-SD, 人膽囊癌細(xì)胞
5637, 人膀胱癌細(xì)胞