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技術(shù)文獻(xiàn)

血清鐵濃度測試盒操作步驟

文字:[大][中][小] 2022-1-18    瀏覽次數(shù):211    

血清鐵濃度測試盒操作步驟(僅供參考):  

1.配制65mM H2O2基液:本試劑盒提供的H2O2基液中的H2O2濃度約為1M。由于過 氧化氫不是非常穩(wěn)定,使用前需自行測定過氧化氫的實(shí)際濃度。把濃度約為1M的H2O2基液用本試劑盒提供的CAT Assay buffer稀釋100倍,使H2O2基液中的H2O2濃度約為10mM。

2.準(zhǔn)備樣品:  

a,細(xì)胞或組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞或組織進(jìn)行裂解,可以采用Leagene Western及IP細(xì)胞裂解液,如果有必要需進(jìn)行適當(dāng)勻漿,低速離心取上清,-70℃凍存,用于CAT的檢測。  

b,血漿、血清和尿液樣品:血漿、血清按照常規(guī)方法制備,用生理鹽水10倍稀釋后, 可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,-70℃凍存,用于CAT的檢測。  

c,全血樣品:收集適量的全血(whole blood)至一抗凝管內(nèi),顛倒混勻。取100μl全 血凍融一次,用CAT Assay buffer1000倍后進(jìn)行CAT檢測。

   

d,血液中的紅細(xì)胞裂解液:用抗凝管收集血液,顛倒混勻。取至少500μl全血4℃3000g離心5min,棄上清,沉淀用預(yù)冷的生理鹽水洗滌3次。  

e,高活性樣品:如果樣品中含有較高活性的CAT,可以使用CAT Assay buffer稀釋。

f,(選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度,以便于后續(xù) 計(jì)算單位蛋白重量組織或細(xì)胞內(nèi)的CAT含量。  

3、CAT檢測:按照下表設(shè)置空白管、自身對照管、測定管,溶液應(yīng)按照順序依次加入,并 注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的酶活性過高,可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。樣品的檢測能設(shè)置平行孔。

4、分光光度計(jì)檢測405nm處吸光度,分光光度計(jì)比色杯光徑0.5cm。如果沒有分光光度計(jì),亦可用酶標(biāo)儀檢測,但如果有條件,盡量采用分光光度計(jì)檢測。蒸餾水調(diào)零,讀取各管吸光度值。一般應(yīng)數(shù)小時(shí)內(nèi)檢測完畢。

Annexin IV 膜粘連蛋白 A4抗體

APG8A 自噬相關(guān)蛋白8A抗體

phospho-Akt (Thr450) 磷酸化蛋白激酶B抗體

phospho-AMPK alpha-1 (Thr198) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體

phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體

APOBEC3G 脫氧胞苷脫氨酶蛋白抗體

AKAP13 蛋白激酶錨定蛋白13抗體

AP1M2 AP-1μ2抗體

Allergin-1 肥大細(xì)胞膜抑制性受體Allergin1抗體

ACCN1 腦鈉通道蛋白1抗體

ARP2/3 subunit 1B 肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3復(fù)合亞單位B1抗體

ABCG2 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體

alpha 1 Fetoprotein 甲胎蛋白抗體

ATM 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體

ABCF2 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

ABLIM3 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM蛋白3抗體

Acidic Calponin 酸性鈣調(diào)蛋白3抗體

phospho-ADAM17 (Thr735) 磷酸化CD156b抗體

ADH5 乙醇脫氫酶5抗體

ADH6 乙醇脫氫酶6抗體

AGPAT5 溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶5抗體

AIPL1 遺傳性失明相關(guān)蛋白AIPL1抗體


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