豬鏈球菌?。⊿treptococcus suis）是一種人畜共患的急性、熱性傳染病，急性
型常為出血性敗血癥和腦膜炎，慢性型以關(guān)節(jié)炎、心內(nèi)膜炎、化膿性淋巴結(jié)炎為特征。
豬鏈球菌呈圓形或卵圓形，常呈鏈狀排列，長(zhǎng)短不一，是革蘭氏陽(yáng)性球菌。在血平板
培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，菌落周圍形成溶血環(huán)。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)其莢膜抗原血清型有 35 種以上。但
是，并非所有的血清型都有致病性。大多數(shù)致病性血清型在 1-9 血清型。血清型 2 為
最常見(jiàn)和毒力最強(qiáng)的血清型。本產(chǎn)品從動(dòng)物檢疫的實(shí)際出發(fā)，建立了 PCR 檢測(cè)方法，
用于豬鏈球菌的快速檢測(cè)。它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照，便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

運(yùn)輸及保存:

使用方法:

一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取豬鏈球菌 DNA。
二、陽(yáng)性對(duì)照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體菌做陽(yáng)性對(duì)照，只
提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 使用本陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。最
好在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（25 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照
S.s 專一性引物一 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無(wú) 無(wú)
S.s 陽(yáng)性對(duì)照 無(wú) 2 uL 無(wú)
補(bǔ)超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR。
過(guò)程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 95℃ 3 min
PCR 反應(yīng)
（30 個(gè)循環(huán)）
95℃ 30 s
50℃ 30 s
72℃ 40 s
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測(cè) PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。