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技術(shù)文獻(xiàn)

鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)檢測(cè)試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備

文字:[大][中][小] 2020-3-18    瀏覽次數(shù):212    

鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)檢測(cè)試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:


ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。


(1)血清


室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


(2)血漿:


應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


(3)尿液:


用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。


(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:


檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。


(5)培養(yǎng)細(xì)胞


   檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。


(6)組織標(biāo)本


   切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。




鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)檢測(cè)試劑盒包含以下各組分:


(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);


(2)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);


(3)酶的底物;


(4)陰性對(duì)照品和陽性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);


(5)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;


(6)洗滌液;


(7)酶反應(yīng)終止液。

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