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技術(shù)文獻(xiàn)

人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)免疫組化試劑盒抗原修復(fù)方法

文字:[大][中][小] 2021-12-9    瀏覽次數(shù):169    

人細(xì)胞角蛋白19(CK-19)免疫組化試劑盒抗原修復(fù)方法:


常用抗原修復(fù)液:檸檬酸緩沖液(0.01M pH6.0)、EDTA 抗原修復(fù)液(pH8.0 或9.0)等等。


一、酶消化修復(fù)法


切片脫蠟水化處理,TBS 沖洗,在組織上滴加胃蛋白酶或胰蛋白酶,37℃孵育20~30min 后TBS 沖洗即可。


二、微波抗原修復(fù)法


微波盒中加入抗原修復(fù)液微波加熱至沸騰,將脫蠟水化后的切片置于耐高溫塑料切片架上,放入已沸騰的緩沖液中,中檔或高檔繼續(xù)微波10~15min,取出微波盒冷卻至室溫后,自來水沖洗,取出切片。因不同微波爐微波處理時(shí)間存在差異,


須自行調(diào)整。


三、直接高壓抗原修復(fù)法


取修復(fù)液于不銹鋼高壓鍋中加熱至沸騰,將組織切片置于耐高溫切片上,修復(fù)


液沸騰后放入切片架,蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)1.5~2.5min 即可脫離熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。


四、隔水式高壓抗原修復(fù)法


不銹鋼高壓鍋中加自來水加熱至沸騰,微波盒中加入修復(fù)液于微波爐中加熱至沸騰,將切片放入微波盒中,再將微波盒放入高壓鍋中蓋上鍋蓋,待噴氣后計(jì)時(shí)4~8 min 即可關(guān)閉熱源,自然冷卻至室溫后自來水沖洗,取出切片。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的修復(fù)。

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