技術(shù)文獻(xiàn)
技術(shù)文獻(xiàn)
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。眾所周知,酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
Aphrodisin 氣味結(jié)合蛋白抗體
ALDH2 乙醛脫氫酶2抗體
Annexin A10 膜粘連蛋白10抗體
Anterior Gradient 2 前梯度同源蛋白2抗體
ALDH1B1 乙醛脫氫酶5抗體
ALF 通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體
ATG4D 自噬相關(guān)蛋白4D抗體
ATG9A 自噬相關(guān)蛋白9A抗體
Aldolase C 醛縮酶C抗體
Aspartate Aminotransferase 谷草轉(zhuǎn)氨酶抗體
ABCG5 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體
ABCG8 三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體
ACADL ?;o酶A脫氫酶長(zhǎng)鏈抗體
ACADM ?;o酶A脫氫酶中鏈抗體
ACADS ?;o酶A脫氫酶短鏈抗體
ACOX1 過氧化物酶?;o酶A氧化酶1抗體
phospho-ASK1 (Ser1033) 磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體
AXUD1 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱氨酸和絲氨酸富含核蛋白1)
Aurora A+B+C 有絲分裂激酶A/B/C抗體